Visita Unifesp/Cintergen

No dia 14 de outubro, foi realizado uma visita na Unifesp/Cintergen, pelos alunos do Projeto de Biotecnologia do Colégio Magister.

O Cintergen (Centro Interdisciplinar de Terapia Gênica) foi fundado em 2004 e realiza pesquisas e estudos de terapia gênica, que é o tratamento de doenças baseado na transferência de material genético. Em sua forma mais simples consiste na inserção de genes funcionais em células com genes defeituosos, para substituir ou complementar esses genes causadores de doenças.

No primeiro momento assistimos palestras de profissionais da área, como o da doutoranda Priscila Matsumoto. Alguns de seus estudos são sobre a Mucopolissacaridose do tipo 1, uma doença genética causada por deficiência de enzimas e também sobre a epidermólise bolhosa distrófica recessiva (EBDR), uma doenças causada pela ausência do colágeno tipo VII, na qual a pele dos pacientes apresenta uma série de bolhas induzidas por traumas, além de feridas e processos inflamatórios espalhados por todo o corpo. Sua proposta é utilizar as células-tronco da medula óssea modificadas para expressar um gene específico para o tratamento.

Visitamos os laboratórios e conhecemos equipamentos e materiais utilizados nas pesquisas. A micropipeta é um instrumento de medição de pequenos volumes de líquidos, aproximadamente 20 microlitros. O fluxo laminar é um equipamento que possui um fluxo de ar, que serve para evitar a contaminação, pois este fluxo não permite a “entrada” de microrganismos. O sequenciador de DNA é uma máquina de alta tecnologia que tem como finalidade determinar a ordem dos nucleotídeos (adenina, guanina, citosina e timina) em uma amostra de DNA. Pode ser usado, por exemplo, para tratar a epidermólise bolhosa pois extrai do DNA o gene do colágeno VII por meio de uma técnica de reação em cadeia da polimerase.

Outro teste realizado, é a manipulação genética em camundongos de laboratório onde a proteína fluorescente verde (GFP), uma macromolécula que mediante irradiação com luz U.V, produz uma intensa fluorescência verde no camundongo inoculado.

Finalmente visitamos um setor onde é realizado o método de inserção de um gene de interesse no plasmídeo, para então ser injetado na bactéria. Esta bactéria cresce sobre o controle de um equipamento de rotação, replicando uma grande quantidade de DNA. 

Grupo: Bruna Barreto, Giovanna Ernandez, Julia Lene, Larissa Ferreira, Lívia Gioia e Nathalia Alves 

2°ano B

Fonte:

http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio12/terapia.pdf

http://www.bv.fapesp.br/pt/bolsas/137407/transplante-autologo-de-celulas-tronco-modificadas-com-o-gene-do-colageno-vii-sob-o-controle-do-prom/

http://www.infoescola.com/genetica/sequenciamento-de-dna/

 

Extração de DNA a partir do sangue humano coagulado para a aplicação nas técnicas de coagulação de antígenos leucocitorios humanos e de reptores semelhantes a imunoglobulina.

O artigo tem como objetivo apresentar um estudo que padroniza uma metodologia de extração de DNA que possua alta qualidade, a partir de amostras de sangue coagulado de antígenos leucocitórios e receptores semelhantes à hemoglobina que utilizam-se da genética para o estudo de doenças humanas que necessitam da presença do DNA genômico extraído do sangue.
Muitas simulações genéticas envolvendo a polimerase para extração do DNA, utilizam amostras de sangue com anticoagulantes, e estas geralmente são descartadas por serem consideradas inapropriadas para os estudos genéticos, uma vez que os resultados não são satisfatórios.
Existem outras técnicas que resultam na obtenção do DNA de alta qualidade, mas estas são muito demoradas e bastante trabalhosas, por isso, a extração do DNA do sangue coagulado apresenta-se extremamente importante já que, além de ser um método rápido e eficiente, utiliza os materiais biológicos que rotineiramente seriam descartados mas que agora podem ser utilizados para implementar parte dos estudos.
Vários métodos foram utilizados para realizar essa pesquisa, dentre ele a coleta de amostra de DNA, extração de DNA de buffy-coat, extração por EZ-DNA, extração de DNA por salting out, genotipagem HLA (Human Leukocyte Amtigens) por PCR-SS0, extração de DNA pelo kit comercial de coluna e genotipagem KIR (killer cell immunoglobulin-like receptors) por PCR-SSP, etc.
Foram utilizados quarenta e oito amostras de sangue humano coagulado para a extração de DNA, e apenas o método de Salting Out foi capaz de extrair altas concentrações substanciais de DNA. O método apresentou-se eficiente, rápido e objetivo, permitindo assim a amplificação dos genes HLA e KIR.
Podemos então concluir que esse método tem aptidão para se sustentar como um método permanentemente efetivo na manipulação dos estudos que a ele se relacionam, uma vez que é rápido e eficaz, proporcionando diversos benefícios para os que com ele se envolvem